2013年以來,山東、江蘇等地的部分肉種雞、蛋雞及麻雞出現(xiàn)了一種以死亡率高,解剖主要表現(xiàn)為肝臟腫大、心包積液為特點的疾病,經(jīng)臨床和實驗室檢測,初步診斷為I亞群C-4型腺病毒感染引起的。該病有蔓延趨勢,希望引起大家關(guān)注。
一 流行病學(xué)調(diào)查
1 商品蛋雞、肉種雞和麻雞都有發(fā)病。
2 發(fā)病日齡主要集中在20~30日齡,最早可見7日齡的雛雞發(fā)病;日死亡率達(dá)2%~3%,病程長達(dá)20天,死淘率達(dá)20%~30%;發(fā)病日齡越早,死淘率越高。
3 有些發(fā)病雛雞來自于同一個種雞場;不同來源的雞苗均有發(fā)病;也有同批次雞分到不同的雞場,有的發(fā)病,有的不發(fā)病。
4 采用康復(fù)雞群的血清對發(fā)病雞有治療效果。
5 康復(fù)雞群的生產(chǎn)性能正常;種雞受精率和孵化率正常,孵化出的商品代生長良好。
二 剖檢癥狀
死亡雞主要表現(xiàn)為肝臟腫大發(fā)黃出血、心包積液、腎臟出血(見圖1、圖2)。
三 實驗室診斷
1 病毒分離培養(yǎng)取病死雞的肝臟研磨,反復(fù)冷凍3次,高速離心,取上清液,接種10日齡SPF雞胚4枚,37℃培養(yǎng)觀察96小時,雞胚無死亡,收取尿囊液進(jìn)行HA檢測,HA為0。
2 瓊擴(kuò)試驗
瓊擴(kuò)板中間孔加入陽性血清,外周孔分別的加入待檢樣品、陽性對照、陰性對照等,濕盒培養(yǎng)72小時,24小時觀察可見中間孔的陽性血清與待檢樣品與陽性對照間出現(xiàn)明顯的沉淀線,與陰性對照之間沒有出現(xiàn)沉淀線。
3 分子生物學(xué)檢測
(1)從處理樣品中,采用試劑盒提取RNA,設(shè)計I亞群C-4型腺病毒(Hexon蛋白)引物,利用一步法進(jìn)行PCR檢測,1%瓊脂糖凝膠電泳,成像系統(tǒng)顯示待檢樣品中含有I亞群C-4型腺病毒(Hexon蛋白)目的性基因片段(見圖3)。
(2)測序分析
對待檢樣品的PCR產(chǎn)物送大連寶生物進(jìn)行基因測序分析(見圖4)。
4 結(jié)論
(1)送檢樣品通過病毒分離沒有檢測到有血凝性的病毒。
(2)送檢樣品通過AGP試驗:待檢樣品與IBH-I亞群陽性血清出現(xiàn)明顯的沉淀線。
(3)送檢樣品通過RT-PCR檢測出現(xiàn)I亞群C-4型的目的性基因片段,經(jīng)測序分析為I亞群-C-4型腺病毒。
四 發(fā)病原因
1 心包積液發(fā)病原因較為復(fù)雜。如1987年在巴基斯坦的肉雞發(fā)生該病的原因是活疫苗污染。很多學(xué)者證實腺病毒在健康雞群中的感染和分離較為普遍,但與其它疾病混合感染時才會導(dǎo)致雞群發(fā)病,如感染了法氏囊病、傳染性貧血或飼喂了霉變飼料。
2 雞群感染I亞群C-4型腺病毒,目前還沒有有力證據(jù)證明該病的發(fā)病規(guī)律和發(fā)病原因,還需要在流行病學(xué)和病原檢測方面進(jìn)一步努力。
3 應(yīng)對發(fā)病雞場和該病流行地區(qū)使用的活疫苗進(jìn)行調(diào)查和檢測外源病毒,來確定是否與免疫活疫苗有關(guān)。
五 防治
1 雞群應(yīng)做好免疫抑制性疾病的防控,如法氏囊病、傳染性貧血、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥、霉菌毒素等誘因均可與腺病毒發(fā)生協(xié)同感染。
2 建議從腺病毒檢測陰性的種雞場進(jìn)雛雞。
3 在活疫苗的選擇方面要慎重,避免使用污染其它病原的活疫苗。
4 發(fā)病雞群無特效藥物,可增加營養(yǎng)以增強(qiáng)體質(zhì),添加適量抗生素防繼發(fā)感染。死亡率高的雞群可以注射特異性卵黃抗體或血清。
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